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        穩(wěn)定性同位素的應(yīng)用領(lǐng)域

        2017-7-7 11:03:20

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         穩(wěn)定性同位素不具有放射性,無論在分離、標(biāo)記化合物合成及應(yīng)用過程中均無特殊防護(hù)要求,操作簡便、使用安全、無毒性,可直接用于動物及人體的營養(yǎng)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)研究及生物醫(yī)學(xué)、藥物研發(fā)、營養(yǎng)代謝等等諸多領(lǐng)域。
          生命科學(xué)領(lǐng)域,核磁共振(NMR)和質(zhì)譜(MS)波譜研究不同蛋白質(zhì)種群的結(jié)構(gòu)、功能等需要穩(wěn)定性同位素整合技術(shù),其中包括同位素編碼親和標(biāo)記方法(ICATTM)、細(xì)胞培養(yǎng)中氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)(SILAC)、目標(biāo)蛋白的絕對定量分析方法(AQUATM)等。穩(wěn)定性同位素通過生物代謝引入、酶解引入或化學(xué)性引入到蛋白質(zhì)等生物大分子中,通過大型儀器分析后選用分子生物學(xué)軟件處理可以得到生物大分子的結(jié)構(gòu)圖。?
         在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,穩(wěn)定性同位素產(chǎn)品目前已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的臨床研究、多種疾病的診斷與鑒別、病情判斷、治療效果評價(jià)、臟器功能研究和新藥開發(fā)等方面,如PET診斷、13C-尿素呼氣法檢測幽門螺旋桿菌、腫瘤治療(硼中子捕獲療法)、藥物研究等。 
          在環(huán)境科學(xué)研究中,在不同的環(huán)境條件下,穩(wěn)定性同位素的組成會有一定的差異,氮同位素就是一種很好的污染物指示劑。在生態(tài)系統(tǒng)污染的監(jiān)測中,測定的15N值還可以作為水域環(huán)境污染程度指標(biāo)。通過使用穩(wěn)定性同位素技術(shù),可以使生態(tài)學(xué)家測出許多隨時(shí)空變化的生態(tài)過程,同時(shí)又不會對生態(tài)系統(tǒng)的自然狀態(tài)和元素的性質(zhì)造成干擾。穩(wěn)定性同位素15N能夠被用來測定植物通過氮固定或吸收土壤NH4+及NO3-獲得氮素相對比率;確定土壤中碳和氮周轉(zhuǎn)速率;判定N2O的來源(硝化細(xì)菌或反硝化細(xì)菌);確定食物鏈的長度;確定空氣和水體污染物的來源;如何確定植物的分布區(qū)域等。?
          能量代謝研究集中在運(yùn)動醫(yī)學(xué)、兒童營養(yǎng)、食物營養(yǎng)以及減肥、宇航員飲食等方面。采用穩(wěn)定性同位素示蹤法是研究新陳代謝的方法之一,常用穩(wěn)定同位素有15N、13C、18O等標(biāo)記。
        糖脂代謝研究,糖尿病是一種以糖代謝失常為主的內(nèi)分泌代謝性疾病,通常表現(xiàn)為整體的代謝紊亂(包括糖、脂、氨基酸代謝紊亂等),因此,非常適合應(yīng)用穩(wěn)定同位素示蹤技術(shù)來弄清代謝物質(zhì)的來龍去脈[8]。該技術(shù)的特點(diǎn)是測試的高精度和超高精度, 可達(dá)到接近PPM級(百萬分之一),它不但能追蹤化合物的整個分子,還能追蹤其某個原子,比如葡萄糖分子各個原子的不同代謝途徑, 哪些原子進(jìn)入了三羧酸循環(huán)產(chǎn)生能量,而哪些原子用于脂肪酸的合成等。早在上世紀(jì)70年代,Bier等[9]就在動物和成人中使用13C和2H標(biāo)記的穩(wěn)定性同位素(雙標(biāo)記法)通過GC/MS監(jiān)測體內(nèi)葡萄糖和丙氨酸的代謝。近期有學(xué)者[12]用 U-13C標(biāo)記葡萄糖,采用核磁共振技術(shù),發(fā)現(xiàn)長期血糖控制不良的1型糖尿病和持續(xù)應(yīng)用胰島素泵血糖控制尚平穩(wěn)的1型糖尿病患者對比,持續(xù)皮下胰島素治療可以明顯減少肝臟內(nèi)源性葡萄糖產(chǎn)生,改善糖異生作用,提示長期血糖控制不良的T1DM肝糖代謝并非不可逆。 
          穩(wěn)定性同位素還可以追蹤不同階段脂質(zhì)合成、脂肪分解、脂肪酸氧化的變化。在肥胖伴有2型糖尿病患者與單純肥胖患者的比較中發(fā)現(xiàn),前者胰島素抑制脂肪分解作用明顯受損[13]。McQuaid等[14]用U-13C標(biāo)記棕櫚酸、亞麻油酸、油酸示蹤,在腹型肥胖和體型偏瘦的正常人中比較發(fā)現(xiàn),肥胖患者脂肪組織量增多,而其脂肪組織儲存脂肪的能力則明顯下降。從而進(jìn)一步導(dǎo)致血漿FFA水平明顯增加和異位脂肪沉積。目前認(rèn)為腹部脂肪堆積引起局部性糖皮質(zhì)激素增多進(jìn)一步加重脂毒性和胰島素抵抗。Basu等[15]在正常人中肝靜脈中注射[9,11,12,12-2H4]氫化可的松(D4-氫化可的松),可的松通過11β羥類固醇脫氫酶1型途徑生成氫化可的松,發(fā)現(xiàn)內(nèi)臟氫化可的松的產(chǎn)生和身體其余部分產(chǎn)生量基本相當(dāng)。然而肥胖患者(不管是否伴有2型糖尿?。┢鋬?nèi)臟氫化可的松產(chǎn)生量明顯增加[16]。
          在農(nóng)業(yè)科研領(lǐng)域,穩(wěn)定性同位素15N、13C廣泛應(yīng)用于植物生理生化研究、土壤與植物營養(yǎng)研究、植物保護(hù)研究、水稻、花卉、農(nóng)產(chǎn)品等作物的改良研究、草地的氮素循環(huán)研究等方面。在農(nóng)業(yè)上應(yīng)用的穩(wěn)定性同位素產(chǎn)品大部分為低豐度產(chǎn)品。低豐度的15N標(biāo)記尿素、15N標(biāo)記硫酸銨、15N標(biāo)記硝酸銨、15N標(biāo)記氯化銨等無機(jī)鹽類是比較常用的肥料示蹤劑。 
          在分析測試領(lǐng)域,食品、農(nóng)藥殘留、興奮劑、海洛因的檢測中,穩(wěn)定性同位素技術(shù)具有獨(dú)特的作用。
          在地質(zhì)學(xué)、地球化學(xué)、古生物學(xué)、生態(tài)學(xué)等研究中也有著廣泛的應(yīng)用。穩(wěn)定同位素標(biāo)記化合物還可作為NMR和質(zhì)譜儀等分析檢測方法的內(nèi)標(biāo)物等。
         
         
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